Biyoloji / Hücre kültürü

Hemositometre Hesaplayıcı (mL Başına Hücre Sayısı ve Canlılık)

Hemositometre sayımlarını mL başına hücre sayısına dönüştürün: her büyük karedeki canlı ve ölü hücreleri ve seyreltmeyi girerek canlı ve toplam konsantrasyonu, canlılık oranını ve süspansiyonunuzdaki hücre sayısını öğrenin.

Hemositometre Hesaplayıcı (mL Başına Hücre Sayısı ve Canlılık): Geliştirilmiş Neubauer kamarasında her büyük kare 0,1 µL hacim tutar; bu nedenle mL başına hücre sayısı = kare başına ortalama sayı × seyreltme × 10⁴ olur. 2× Trypan mavisi seyreltmesiyle 52, 47, 55 ve 49 canlı hücre sayımı, 50,75 × 2 × 10⁴ = 1,015 × 10⁶ mL başına canlı hücre verir; bunların arasında 18 ölü hücre varsa canlılık oranı 203 ÷ 221 = 91,9% olur. Sunucuya hiçbir dosya yüklenmeden tarayıcınızda %100 yerel olarak çalışır.

Çalıştırma sayısı
Tarayıcınızda
Maliyet
Ücretsiz · kayıt gerekmez
Kullanılabilirlik
Kullanıma hazır
Hemositometre hesaplayıcıYerel işleme

Tamamen tarayıcınızda çalışır

mL başına canlı hücreler1,015 × 10^6
Canlılık91,9%221 sayımdan 203 canlı
mL başına toplam hücre1,105 × 10^6
Süspansiyondaki canlı hücreler1,015 × 10^7

Geliştirilmiş Neubauer kamarasında her büyük köşe karesi 0,1 µL (1 mm × 1 mm × 0,1 mm) içerir; bu nedenle mL başına hücre sayısı = kare başına ortalama sayım × seyreltme faktörü × 10.000 olur. Dört köşe karesini sayın; iki kenardaki hücreleri dahil edin, diğer iki kenardakileri dahil etmeyin ve kare başına 20–200 hücre hedefleyin. Daha fazla hücre varsa daha çok seyreltin. Trypan blue ölü hücrelere girerek onları maviye boyar; eşit hacimleri karıştırmak seyreltmeyi iki katına çıkarır.

Plakaya hücre ekimi

1,015 × 10⁶ canlı hücre/mL yoğunluğundaki bir süspansiyondan kuyucuk başına 2 × 10⁵ hücre eklemek için her kuyucuğa 0,197 mL, yani yaklaşık 197 µL ekleyin.

Süspansiyonu hedef yoğunluğa seyreltmek için seyreltme hesaplayıcısını kullanın.

Doğruluğu artırma

Örnek almadan önce süspansiyonu iyice karıştırın, kamarayı tek ve akıcı bir hareketle doldurun ve her iki kamarayı da sayın: sayılan hücre sayısının karekökü arttıkça sayım hatası azalır; 400 hücre yaklaşık ±%5 hata verir.

Ortalama hesaplayıcı, kareler arasındaki dağılımı da göstererek düzensiz doldurmayı ortaya çıkarır.

Nasıl kullanılır?

  1. Büyük köşe karelerinin her birindeki canlı ve ölü (boyanmış) hücreleri ayrı ayrı sayın.
  2. Sayımları ve seyreltme faktörünü girin; Trypan mavisiyle eşit karışım için 2 kullanın.
  3. mL başına canlı hücre sayısını, canlılık oranını ve toplamı okuyun.

Gizlilik ve sınırlamalar

Her şey tarayıcıda hesaplanır.

İlgili araçlar

Sık sorulan sorular

Hangi kareleri saymalıyım?

Dört büyük köşe karesini sayın. Küçük hücreler için merkez karenin 25 küçük karesini de kullanabilirsiniz; bu durumda toplamı tek kare olarak girip ayarlayın. Üst ve sol çizgilere değen, alt ve sağ çizgilere değmeyen hücreleri sayın.

Bir karede kaç hücre olmalı?

Doğru bir sayım için yaklaşık 20–200 hücre uygundur; daha fazla hücre varsa daha fazla seyreltin, daha az varsa daha fazla kare sayın.

Hangi canlılık oranı kabul edilebilir?

Bu, hücrelere ve deneye bağlıdır; sağlıklı kültürlerde 90% üzeri yaygındır, 80% altı ise bir soruna işaret eder.

Ücretsiz araç · tarayıcınızda kez çalıştırma · hesap gerekmez