Biología / Cultivo celular
Calculadora de hemocitómetro (células por mL y viabilidad)
Convierte los recuentos del hemocitómetro en células por mililitro: introduce las células vivas y muertas de cada cuadrado grande y la dilución para obtener la concentración de células vivas y totales, la viabilidad y las células de tu suspensión.
Calculadora de hemocitómetro (células por mL y viabilidad): En una cámara de Neubauer mejorada, cada cuadrado grande contiene 0,1 µL, por lo que células por mL = recuento medio por cuadrado × dilución × 10⁴. Los recuentos de 52, 47, 55 y 49 células vivas con una dilución de 2× con azul de tripano dan 50,75 × 2 × 10⁴ = 1,015 × 10⁶ células vivas por mL; con 18 células muertas entre ellas, la viabilidad es 203 ÷ 221 = 91,9%. Funciona al 100 % en tu navegador, sin subir archivos a ningún servidor.
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En una cámara de Neubauer mejorada, cada cuadrado grande de las esquinas contiene 0.1 µL (1 mm × 1 mm × 0.1 mm), por lo que células por mL = recuento medio por cuadrado × factor de dilución × 10,000. Cuenta los cuatro cuadrados de las esquinas, incluyendo las células de dos de los bordes, pero no las de los otros dos, y procura obtener entre 20–200 células por cuadrado; diluye más si hay más. El azul de tripano entra en las células muertas y las tiñe de azul; mezclar volúmenes iguales duplica la dilución.
Sembrar una placa
Para sembrar 2 × 10⁵ células por pocillo a partir de una suspensión con 1,015 × 10⁶ células vivas por mL, añade 0,197 mL, aproximadamente 197 µL, a cada pocillo.
Para diluir la suspensión hasta alcanzar una densidad objetivo, usa la calculadora de diluciones.
Mejorar la precisión
Mezcla bien la suspensión antes de tomar la muestra, carga la cámara con un flujo continuo y cuenta ambas cámaras: el error de recuento disminuye con la raíz cuadrada del número de células contadas, por lo que 400 células dan aproximadamente ±5%.
La calculadora de promedios también muestra la dispersión entre cuadrados, lo que permite detectar una carga desigual.
Cómo se usa
- Cuenta por separado las células vivas y muertas (teñidas) de cada cuadrado grande de las esquinas.
- Introduce los recuentos y el factor de dilución: 2 para una mezcla a partes iguales con azul de tripano.
- Consulta las células vivas por mL, la viabilidad y el total.
Privacidad y límites
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Preguntas frecuentes
¿Qué cuadrados debo contar?
Los cuatro cuadrados grandes de las esquinas (o los 25 cuadrados pequeños del cuadrado central para células pequeñas; en ese caso, introduce el total como un cuadrado y ajústalo); cuenta las células que toquen las líneas superior e izquierda, pero no las líneas inferior y derecha.
¿Cuántas células debe haber en un cuadrado?
Aproximadamente entre 20 y 200 para obtener un recuento preciso; diluye más si hay más células o cuenta más cuadrados si hay menos.
¿Qué viabilidad es aceptable?
Depende de las células y del experimento; más del 90% es habitual en cultivos sanos y menos del 80% sugiere que existe un problema.
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