生物学 / 细胞培养

血球计数板计算器(每mL细胞数和细胞活率)

将血球计数板的计数转换为每毫升细胞数:输入每个大方格中的活细胞和死细胞数量以及稀释倍数,即可获得活细胞浓度、总细胞浓度、细胞活率和悬液中的细胞数。

血球计数板计算器(每mL细胞数和细胞活率): 在改良Neubauer计数板中,每个大方格的容积为0.1 µL,因此每mL细胞数=每个方格的平均计数×稀释倍数×10⁴。若4个方格中的活细胞数分别为52、47、55和49,台盼蓝稀释倍数为2,则每mL活细胞数为50.75 × 2 × 10⁴=1.015 × 10⁶;其中有18个死细胞时,细胞活率为203 ÷ 221=91.9%。 完全在浏览器中本地运行,文件不会上传到服务器。

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每mL活细胞数1.015 × 10^6
存活率91.9%已计数的221个中有203个活细胞
每mL总细胞数1.105 × 10^6
悬液中的活细胞1.015 × 10^7

在改良Neubauer计数板中,每个角落大方格的体积为0.1 µL(1 mm × 1 mm × 0.1 mm),因此每mL细胞数 = 每个方格的平均计数 × 稀释倍数 × 10,000。计数四个角落方格,将位于其中两条边上的细胞计入,但不计入另外两条边上的细胞;每个方格以计数20–200个细胞为宜,数量更多时应进一步稀释。台盼蓝会进入死细胞并将其染成蓝色;等体积混合会使稀释倍数加倍。

铺板接种

如需从浓度为1.015 × 10⁶个活细胞/mL的细胞悬液中,以每孔2 × 10⁵个细胞的密度接种,每孔应加入0.197 mL,即约197 µL。

如需将细胞悬液稀释到目标密度,请使用稀释计算器。

提高准确性

取样前充分混匀细胞悬液,以平稳流速将其注入计数室,并对两个计数室都进行计数:计数误差会随所计细胞数的平方根而降低,因此计数400个细胞时,误差约为±5%。

平均值计算器还会显示各方格之间的离散程度,有助于发现加样不均匀。

使用方法

  1. 分别统计每个大角方格中的活细胞和死细胞(染色细胞)。
  2. 输入计数和稀释倍数;与台盼蓝等体积混合时,稀释倍数为2。
  3. 查看每mL活细胞数、细胞活率和总细胞数。

隐私与限制

所有计算都在您的浏览器中进行。

相关工具

常见问题

应该统计哪些方格?

统计四个角上的大方格;如果细胞较小,也可以统计中央方格中的25个小方格,此时将总数作为一个方格的计数输入并进行调整。统计碰到上边线和左边线、但不碰到底边线和右边线的细胞。

一个方格中应有多少个细胞?

为了获得准确结果,通常应有约20–200个细胞;如果更多,请进一步稀释;如果更少,请统计更多方格。

细胞活率达到多少才算合适?

这取决于细胞类型和实验;健康培养物通常高于90%,低于80%则可能说明存在问题。

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