Biologija / Ćelijska kultura

Kalkulator hemocitometra (ćelije po mL i vijabilnost)

Pretvorite rezultate brojanja hemocitrometra u broj ćelija po mililitru: unesite broj živih i mrtvih ćelija u svakom velikom kvadratu i razblaženje da biste dobili koncentraciju živih i ukupnih ćelija, vijabilnost i broj ćelija u suspenziji.

Kalkulator hemocitometra (ćelije po mL i vijabilnost): U poboljšanoj Neubauerovoj komori svaki veliki kvadrat ima zapreminu od 0.1 µL, pa je broj ćelija po mL = prosečan broj ćelija po kvadratu × razblaženje × 10⁴. Brojanje 52, 47, 55 i 49 živih ćelija uz razblaženje tripan plavim od 2× daje 50.75 × 2 × 10⁴ = 1.015 × 10⁶ živih ćelija po mL; uz 18 mrtvih ćelija među njima, vijabilnost je 203 ÷ 221 = 91.9%. Radi 100% lokalno u vašem pregledaču, bez otpremanja datoteka na server.

Kategorija
Alatke za školu i učenje
Pokretanja
U vašem pregledaču
Trošak
Besplatno · bez registracije
Dostupnost
Spremno za upotrebu
Kalkulator za hemocitometarLokalna obrada

U potpunosti radi u vašem pregledaču

Žive ćelije po mL1,015 × 10^6
Živost91,9%203 živih od 221 prebrojanih
Ukupno ćelija po mL1,105 × 10^6
Žive ćelije u suspenziji1,015 × 10^7

U poboljšanoj Neubauerovoj komori svaki veliki ugaoni kvadrat sadrži 0.1 µL (1 mm × 1 mm × 0.1 mm), pa je broj ćelija po mL = prosečan broj po kvadratu × faktor razblaženja × 10,000. Prebrojte četiri ugaona kvadrata, uključujući ćelije na dve ivice, ali ne i na druge dve, i ciljajte na 20–200 ćelija po kvadratu; dodatno razblažite ako ih ima više. Tripan-plavo ulazi u mrtve ćelije i boji ih plavo; mešanje jednakih zapremina udvostručuje razblaženje.

Zasejavanje ploče

Da biste zasejali 2 × 10⁵ ćelija po jažici iz suspenzije sa 1.015 × 10⁶ živih ćelija po mL, dodajte 0.197 mL, odnosno oko 197 µL, u svaku jažicu.

Da biste razblažili suspenziju do ciljane gustine, koristite kalkulator razblaživanja.

Povećanje tačnosti

Dobro promešajte suspenziju pre uzorkovanja, napunite komoru jednim ravnomernim mlazom i izbrojte obe komore: greška brojanja opada kao kvadratni koren broja izbrojanih ćelija, pa 400 ćelija daje približno ±5%.

Kalkulator proseka takođe prikazuje raspon između kvadrata, što ukazuje na neravnomerno punjenje.

Kako se koristi

  1. Prebrojte ćelije u svakom velikom ugaonom kvadratu, odvojeno žive i mrtve (obojene).
  2. Unesite rezultate brojanja i faktor razblaženja, 2 za mešavinu u jednakoj razmeri sa tripan plavim.
  3. Očitajte broj živih ćelija po mL, vijabilnost i ukupan broj ćelija.

Privatnost i ograničenja

Sve se računa u vašem pregledaču.

Srodne alatke

RazblaživanjeProsekMolarnost

Često postavljana pitanja

Koje kvadrate treba da brojim?

Četiri velika ugaona kvadrata (ili 25 malih kvadrata centralnog kvadrata za male ćelije; u tom slučaju unesite ukupan broj kao jedan kvadrat i prilagodite izračunavanje); brojite ćelije koje dodiruju gornju i levu liniju, ali ne i donju i desnu.

Koliko ćelija treba da bude u jednom kvadratu?

Oko 20–200 za precizno brojanje; dodatno razblažite uzorak ako ih ima više ili prebrojte više kvadrata ako ih ima manje.

Koja vijabilnost je prihvatljiva?

Zavisi od ćelija i eksperimenta; za zdrave kulture uobičajena je vrednost iznad 90%, dok vrednost ispod 80% ukazuje na problem.

Besplatan alat · pokretanja: u vašem pregledaču · nalog nije potreban