Биология / Культура клеток
Калькулятор для гемоцитометра (клетки на mL и жизнеспособность)
Преобразуйте результаты подсчёта в гемоцитометре в количество клеток на миллилитр: введите число живых и мёртвых клеток в каждом большом квадрате и разведение, чтобы получить концентрацию живых и всех клеток, жизнеспособность и количество клеток в суспензии.
Калькулятор для гемоцитометра (клетки на mL и жизнеспособность): В улучшенной камере Нойбауэра каждый большой квадрат имеет объём 0.1 µL, поэтому количество клеток на mL = среднее число клеток в квадрате × разведение × 10⁴. При подсчёте 52, 47, 55 и 49 живых клеток и разведении с трипановым синим 2× получается 50.75 × 2 × 10⁴ = 1.015 × 10⁶ живых клеток на mL; если среди них 18 мёртвых клеток, жизнеспособность составляет 203 ÷ 221 = 91.9%. Работает на 100% локально в вашем браузере, файлы на сервер не загружаются.
- Категория
- Инструменты для учёбы и школы
- Запуски
- В вашем браузере
- Стоимость
- Бесплатно · без регистрации
- Доступность
- Готово к использованию
Полностью работает в браузере
В усовершенствованной камере Нойбауэра каждый большой угловой квадрат содержит 0.1 µL (1 mm × 1 mm × 0.1 mm), поэтому количество клеток на mL = среднее количество клеток в квадрате × коэффициент разведения × 10,000. Подсчитайте четыре угловых квадрата, включая клетки на двух краях, но не на двух других, и стремитесь получить 20–200 клеток в квадрате; при большем количестве разбавьте образец сильнее. Трипановый синий проникает в мёртвые клетки и окрашивает их в синий цвет; смешивание равных объёмов вдвое увеличивает разведение.
Посев в лунки планшета
Чтобы внести 2 × 10⁵ клеток в каждую лунку из суспензии с концентрацией 1.015 × 10⁶ живых клеток на mL, добавьте в каждую лунку 0.197 mL, то есть около 197 µL.
Чтобы разбавить суспензию до нужной концентрации, воспользуйтесь калькулятором разведения.
Повышение точности
Хорошо перемешайте суспензию перед отбором пробы, заполните камеру одним плавным движением и посчитайте клетки в обеих камерах: ошибка подсчёта уменьшается пропорционально квадратному корню из числа подсчитанных клеток, поэтому для 400 клеток она составляет около ±5%.
Калькулятор среднего значения также показывает разброс между квадратами, что помогает выявить неравномерное заполнение.
Как пользоваться
- Подсчитайте отдельно живые и мёртвые (окрашенные) клетки в каждом большом угловом квадрате.
- Введите результаты подсчёта и коэффициент разведения: 2 для смешивания в равных пропорциях с трипановым синим.
- Посмотрите количество живых клеток на mL, жизнеспособность и общее количество клеток.
Конфиденциальность и ограничения
Все вычисления выполняются в вашем браузере.
Похожие инструменты
Часто задаваемые вопросы
Какие квадраты нужно считать?
Четыре больших угловых квадрата (или 25 малых квадратов центрального квадрата для небольших клеток; в этом случае введите их общее количество как для одного квадрата и скорректируйте результат). Считайте клетки, касающиеся верхней и левой линий, но не касающиеся нижней и правой.
Сколько клеток должно быть в одном квадрате?
Примерно 20–200 для точного подсчёта. Если клеток больше, разведите образец сильнее; если меньше — подсчитайте больше квадратов.
Какая жизнеспособность считается приемлемой?
Это зависит от типа клеток и эксперимента: для здоровых культур обычно нормальным считается показатель выше 90%, а показатель ниже 80% указывает на возможную проблему.
Бесплатный инструмент · запусков: в вашем браузере · аккаунт не нужен