Biologia / Cultura celular
Calculadora de Hemocitômetro (Células por mL e Viabilidade)
Transforme contagens do hemocitômetro em células por mililitro: informe as células vivas e mortas em cada quadrado grande e a diluição para obter a concentração de células vivas e total, a viabilidade e a quantidade de células na sua suspensão.
Calculadora de Hemocitômetro (Células por mL e Viabilidade): Em uma câmara de Neubauer aprimorada, cada quadrado grande comporta 0,1 µL; portanto, células por mL = contagem média por quadrado × diluição × 10⁴. Contagens de 52, 47, 55 e 49 células vivas com uma diluição de 2× em azul de tripano resultam em 50,75 × 2 × 10⁴ = 1,015 × 10⁶ células vivas por mL; com 18 células mortas entre elas, a viabilidade é 203 ÷ 221 = 91,9%. Roda 100% localmente no seu navegador, sem enviar nenhum arquivo para o servidor.
- Categoria
- Ferramentas para escola e estudos
- Execuções
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- Custo
- Grátis · sem cadastro
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Em uma câmara de Neubauer aprimorada, cada quadrado grande de canto comporta 0.1 µL (1 mm × 1 mm × 0.1 mm), então células por mL = contagem média por quadrado × fator de diluição × 10,000. Conte os quatro quadrados dos cantos, incluindo as células em duas das bordas, mas não nas outras duas, e procure obter 20–200 células por quadrado; dilua mais se houver mais células. O azul de tripano entra nas células mortas e as cora de azul; misturar volumes iguais dobra a diluição.
Semeadura de uma placa
Para semear 2 × 10⁵ células por poço a partir de uma suspensão com 1,015 × 10⁶ células vivas por mL, adicione 0,197 mL, aproximadamente 197 µL, a cada poço.
Para diluir a suspensão até uma densidade-alvo, use a calculadora de diluição.
Aumento da precisão
Misture bem a suspensão antes de coletar a amostra, carregue a câmara em um fluxo contínuo e suave e conte ambas as câmaras: o erro de contagem diminui conforme a raiz quadrada do número de células contadas, então 400 células resultam em aproximadamente ±5%.
A calculadora de média também mostra a dispersão entre os quadrados, o que indica um carregamento irregular.
Como usar
- Conte as células em cada quadrado grande dos cantos, separando as vivas das mortas (coradas).
- Informe as contagens e o fator de diluição: 2 para uma mistura em partes iguais com azul de tripano.
- Veja as células vivas por mL, a viabilidade e o total.
Privacidade e limitações
Tudo é calculado no seu navegador.
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Perguntas frequentes
Quais quadrados devo contar?
Os quatro quadrados grandes dos cantos (ou os 25 quadrados pequenos do quadrado central para células pequenas; nesse caso, informe o total como um quadrado e faça o ajuste); conte as células que tocam as linhas superior e esquerda, mas não as linhas inferior e direita.
Quantas células deve haver em um quadrado?
Cerca de 20–200 para uma contagem precisa; faça uma diluição maior se houver mais células ou conte mais quadrados se houver menos.
Qual viabilidade é aceitável?
Depende das células e do experimento; acima de 90% é comum em culturas saudáveis, enquanto abaixo de 80% sugere um problema.
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