जीव विज्ञान / कोशिका संवर्धन

हीमोसाइटोमीटर कैलकुलेटर (mL में कोशिकाएँ और जीवितता)

हीमोसाइटोमीटर की गिनती को मिलीलीटर में कोशिकाओं की संख्या में बदलें: हर बड़े वर्ग में जीवित और मृत कोशिकाओं की संख्या और डायल्यूशन दर्ज करें, फिर जीवित व कुल सांद्रता, जीवितता और आपके सस्पेंशन में कोशिकाओं की संख्या पाएँ।

हीमोसाइटोमीटर कैलकुलेटर (mL में कोशिकाएँ और जीवितता): इम्प्रूव्ड Neubauer chamber में हर बड़ा वर्ग 0.1 µL का होता है, इसलिए mL में कोशिकाएँ = प्रति वर्ग औसत गिनती × डायल्यूशन × 10⁴। 2× ट्रिपैन ब्लू डायल्यूशन के साथ 52, 47, 55 और 49 जीवित कोशिकाओं की गिनती से 50.75 × 2 × 10⁴ = 1.015 × 10⁶ जीवित कोशिकाएँ प्रति mL मिलती हैं; इनमें 18 मृत कोशिकाएँ होने पर जीवितता 203 ÷ 221 = 91.9% होती है। यह आपके ब्राउज़र में 100% स्थानीय रूप से चलता है और सर्वर पर कोई फ़ाइल अपलोड नहीं होती।

रन
आपके ब्राउज़र में
लागत
मुफ़्त · साइन अप की ज़रूरत नहीं
उपलब्धता
इस्तेमाल के लिए तैयार
हीमोसाइटोमीटर कैलकुलेटरलोकल प्रोसेसिंग

पूरी तरह आपके ब्राउज़र में चलता है

प्रति mL जीवित कोशिकाएँ1.015 × 10^6
जीवितता91.9%गिने गए 221 में से 203 जीवित
प्रति mL कुल कोशिकाएँ1.105 × 10^6
सस्पेंशन में जीवित कोशिकाएँ1.015 × 10^7

एक बेहतर Neubauer चैंबर में हर बड़ा कोने वाला वर्ग 0.1 µL (1 mm × 1 mm × 0.1 mm) रखता है, इसलिए प्रति mL कोशिकाएँ = प्रति वर्ग औसत संख्या × डायल्यूशन फ़ैक्टर × 10,000। चारों कोने वाले वर्गों को गिनें; दो किनारों पर मौजूद कोशिकाओं को शामिल करें, लेकिन बाकी दो किनारों पर मौजूद कोशिकाओं को नहीं। हर वर्ग में 20–200 कोशिकाओं का लक्ष्य रखें; यदि कोशिकाएँ इससे अधिक हों, तो और डायल्यूट करें। Trypan blue मृत कोशिकाओं में प्रवेश करके उन्हें नीला रंग देता है; समान मात्रा मिलाने से डायल्यूशन दोगुना हो जाता है।

प्लेट में कोशिकाएँ सीड करना

1.015 × 10⁶ जीवित कोशिकाएँ प्रति mL वाले सस्पेंशन से प्रति वेल 2 × 10⁵ कोशिकाएँ सीड करने के लिए, प्रत्येक वेल में 0.197 mL, यानी लगभग 197 µL, डालें।

सस्पेंशन को लक्ष्य घनत्व तक पतला करने के लिए डाइल्यूशन कैलकुलेटर का उपयोग करें।

सटीकता में सुधार

सैंपल लेने से पहले सस्पेंशन को अच्छी तरह मिलाएँ, चैंबर को एक समान प्रवाह में भरें और दोनों चैंबरों की गिनती करें: गिनी गई कोशिकाओं की संख्या के वर्गमूल के साथ गिनती की त्रुटि घटती है, इसलिए 400 कोशिकाओं पर यह लगभग ±5% होती है।

औसत कैलकुलेटर वर्गों के बीच का फैलाव भी दिखाता है, जिससे असमान लोडिंग का पता चलता है।

इस्तेमाल करने का तरीका

  1. हर बड़े कोने वाले वर्ग में जीवित और मृत (रंगे हुए) कोशिकाओं को अलग-अलग गिनें।
  2. गिनतियाँ और डायल्यूशन फ़ैक्टर दर्ज करें; ट्रिपैन ब्लू के साथ बराबर मिश्रण के लिए 2 दर्ज करें।
  3. mL में जीवित कोशिकाएँ, जीवितता और कुल संख्या देखें।

गोपनीयता और सीमाएँ

हर गणना आपके ब्राउज़र में होती है।

संबंधित टूल्स

अक्सर पूछे जाने वाले सवाल

मुझे किन वर्गों को गिनना चाहिए?

चार बड़े कोने वाले वर्ग गिनें (या छोटी कोशिकाओं के लिए बीच वाले वर्ग के 25 छोटे वर्ग; ऐसी स्थिति में कुल संख्या को एक वर्ग की गिनती के रूप में दर्ज करके समायोजित करें)। ऊपर और बाईं रेखा को छूने वाली, लेकिन नीचे और दाईं रेखा को न छूने वाली कोशिकाओं को गिनें।

एक वर्ग में कितनी कोशिकाएँ होनी चाहिए?

सटीक गिनती के लिए लगभग 20–200 कोशिकाएँ होनी चाहिए; इससे अधिक हों तो और डायल्यूशन करें, और कम हों तो अधिक वर्ग गिनें।

कितनी जीवितता स्वीकार्य मानी जाती है?

यह कोशिकाओं और प्रयोग पर निर्भर करता है; स्वस्थ कल्चर के लिए 90% से अधिक आम है, जबकि 80% से कम जीवितता किसी समस्या का संकेत देती है।

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