生物学 / 細胞培養
血球計算盤計算機(mLあたりの細胞数と生存率)
血球計算盤のカウントをmLあたりの細胞数に変換します。各大マスの生細胞と死細胞、希釈倍率を入力すると、生細胞濃度、総細胞濃度、生存率、懸濁液中の細胞数がわかります。
血球計算盤計算機(mLあたりの細胞数と生存率): 改良ノイバウエル計算盤では、各大マスの容積は0.1 µLです。そのため、mLあたりの細胞数 = 1マスあたりの平均カウント × 希釈倍率 × 10⁴となります。生細胞を52、47、55、49個、トリパンブルーによる2×の希釈で数えた場合、50.75 × 2 × 10⁴ = 1.015 × 10⁶生細胞/mLです。その中に死細胞が18個ある場合、生存率は203 ÷ 221 = 91.9%です。 サーバーへのファイルアップロードは一切なく、100%ブラウザ内でローカル実行します。
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完全にブラウザ内で実行します
改良ノイバウエル計算盤では、各隅の大マスに0.1 µL(1 mm × 1 mm × 0.1 mm)が入るため、1 mLあたりの細胞数 = 1マスあたりの平均細胞数 × 希釈倍率 × 10,000となります。4つの隅の大マスを数え、2辺上の細胞は含め、残り2辺上の細胞は含めないでください。1マスあたり20–200個を目安とし、それより多い場合はさらに希釈します。トリパンブルーは死細胞に入り、細胞を青く染色します。同量を混合すると希釈倍率は2倍になります。
プレートへの播種
1ウェルあたり2 × 10⁵個の細胞を、1 mLあたり1.015 × 10⁶個の生細胞を含む懸濁液から播種する場合、各ウェルに0.197 mL、約197 µLを加えます。
懸濁液を目標濃度まで希釈するには、希釈計算機を使用してください。
精度を高める
サンプリング前に懸濁液をよく混ぜ、チャンバーには一度に滑らかに注入し、両方のチャンバーを数えてください。計数誤差は数えた細胞数の平方根に応じて小さくなるため、400個の細胞を数えると誤差は約±5%になります。
平均計算機では、方眼間のばらつきも確認できるため、注入の偏りを見つけるのに役立ちます。
使い方
- 四隅にある各大マスの細胞を、生細胞と死細胞(染色細胞)に分けて数えます。
- カウント数と希釈倍率を入力します。トリパンブルーと等量混合した場合は2です。
- mLあたりの生細胞数、生存率、総細胞数を確認します。
プライバシーと制限事項
すべての計算はブラウザ内で行われます。
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よくある質問
どのマスを数えればよいですか?
四隅にある4つの大マスを数えます(小さい細胞の場合は中央の25個の小マスを数える方法もあります。その場合は合計を1マス分として入力し、調整してください)。上と左の線に触れている細胞は数え、下と右の線に触れている細胞は数えません。
1マスには何個の細胞があればよいですか?
正確に数えるには約20–200個が目安です。それより多ければさらに希釈し、少なければ数えるマスを増やしてください。
許容できる生存率はどのくらいですか?
細胞の種類や実験によって異なります。健全な培養では90%超が一般的で、80%未満の場合は問題がある可能性があります。
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