Biologia / Coltura cellulare
Calcolatore per emacitometro (cellule per mL e vitalità)
Trasforma i conteggi dell'emacitometro in cellule per millilitro: inserisci le cellule vive e morte in ogni quadrato grande e la diluizione per ottenere la concentrazione delle cellule vive e totali, la vitalità e il numero di cellule nella sospensione.
Calcolatore per emacitometro (cellule per mL e vitalità): In una camera di Neubauer migliorata, ogni quadrato grande contiene 0,1 µL, quindi cellule per mL = conteggio medio per quadrato × diluizione × 10⁴. I conteggi di 52, 47, 55 e 49 cellule vive con una diluizione 2× con blu tripano danno 50,75 × 2 × 10⁴ = 1,015 × 10⁶ cellule vive per mL; con 18 cellule morte, la vitalità è 203 ÷ 221 = 91,9%. Funziona al 100% localmente nel browser, senza caricare file sul server.
- Categoria
- Strumenti per scuola e studio
- Esecuzioni
- Nel browser
- Costo
- Gratuito · senza registrazione
- Disponibilità
- Pronto all'uso
Funziona interamente nel browser
In una camera di Neubauer migliorata, ogni quadrato grande nell'angolo contiene 0,1 µL (1 mm × 1 mm × 0,1 mm), quindi cellule per mL = conteggio medio per quadrato × fattore di diluizione × 10.000. Conta i quattro quadrati agli angoli, includendo le cellule su due dei bordi ma non sulle altre due, e cerca di ottenere 20–200 cellule per quadrato; diluisci maggiormente se sono di più. Il blu di tripano entra nelle cellule morte e le colora di blu; mescolare volumi uguali raddoppia la diluizione.
Semina di una piastra
Per seminare 2 × 10⁵ cellule per pozzetto partendo da una sospensione con 1,015 × 10⁶ cellule vive per mL, aggiungi 0,197 mL, circa 197 µL, a ogni pozzetto.
Per diluire la sospensione fino alla densità desiderata, usa il calcolatore di diluizione.
Migliorare la precisione
Mescola bene la sospensione prima del campionamento, carica la camera con un flusso uniforme e conta entrambe le camere: l'errore di conteggio diminuisce con la radice quadrata del numero di cellule contate, quindi 400 cellule danno circa ±5%.
Anche il calcolatore della media mostra la variazione tra i quadrati, segnalando un caricamento non uniforme.
Come usarlo
- Conta separatamente le cellule vive e morte (colorate) in ogni quadrato grande d'angolo.
- Inserisci i conteggi e il fattore di diluizione, 2 per una miscela in parti uguali con blu tripano.
- Leggi le cellule vive per mL, la vitalità e il totale.
Privacy e limitazioni
Tutto viene calcolato nel tuo browser.
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Domande frequenti
Quali quadrati devo contare?
I quattro quadrati grandi agli angoli (oppure i 25 quadratini del quadrato centrale per le cellule piccole: in questo caso inserisci il totale come un solo quadrato e adatta il conteggio); conta le cellule che toccano le linee superiore e sinistra, ma non quelle inferiore e destra.
Quante cellule dovrebbe contenere un quadrato?
Circa 20–200 per ottenere un conteggio accurato; diluisci di più se sono più numerose oppure conta più quadrati se sono meno numerose.
Quale livello di vitalità è accettabile?
Dipende dalle cellule e dall'esperimento; oltre il 90% è comune per colture sane, mentre al di sotto dell'80% può indicare un problema.
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