Labo / Acides et bases

Calculateur de tampon (préparation selon Henderson–Hasselbalch)

Préparez un tampon à un pH cible : choisissez un tampon courant comme le phosphate, le Tris, l’acétate ou le HEPES, ou saisissez n’importe quelle valeur de pKa pour obtenir le rapport, les concentrations et les masses des formes acide et basique correspondant

Calculateur de tampon (préparation selon Henderson–Hasselbalch): L’équation de Henderson–Hasselbalch donne pH = pKa + log₁₀([base] ÷ [acide]) ; le rapport est donc 10^(pH − pKa). Pour un tampon phosphate à 100 mM et pH 7,4 (pKa 7,2), le rapport est de 1,585 : 38,7 mM de dihydrogénophosphate de sodium et 61,3 mM d’hydrogénophosphate disodique. Les masses utilisent les masses molaires anhydres indiquées pour chaque tampon. Fonctionne 100 % localement dans votre navigateur, sans aucun téléversement de fichier vers le serveur.

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Rapport base ÷ acide1,5849pH = 7,2 + log₁₀(1,585)
Dihydrogénophosphate de sodium38,69 mM2,321 g pour ce volume
Hydrogénophosphate disodique61,31 mM4,352 g pour ce volume

L’équation de Henderson–Hasselbalch, pH = pKa + log₁₀([base] ÷ [acide]), donne le rapport entre les deux formes pour un pH cible ; à pH = pKa, elles sont en proportions égales. Les masses supposent les formes anhydres, avec les masses molaires indiquées dans les formules sources de la liste ; vérifiez l’étiquette du produit que vous pesez, car les hydrates sont plus lourds. Les valeurs de pKa sont données à 25 °C et varient avec la température et la force ionique, particulièrement dans le cas du Tris ; ajustez donc le pH final avec un pH-mètre.

Exemple détaillé

500 mL de tampon Tris à 50 mM et pH 8,0 (pKa 8,07) : rapport 10^(−0,07) = 0,851, soit 27,0 mM de Tris-HCl et 23,0 mM de Tris base : 2,128 g et 1,393 g.

Pour vérifier le pH d'un acide faible ou d'une base faible seuls, utilisez le calculateur de pH.

Hydrates et sels

Les sels de phosphate sont souvent vendus sous forme d'hydrates : Na₂HPO₄·7H₂O correspond à 268,07 g/mol, et non à 141,96 ; ajustez donc la masse selon le rapport des masses molaires. Le calculateur de masse molaire donne la masse de n'importe quelle formule.

Préparez des solutions mères concentrées de chaque forme et mélangez-les, puis diluez avec le calculateur de dilution.

Comment l'utiliser

  1. Choisissez le tampon ou saisissez sa valeur de pKa.
  2. Saisissez le pH cible, la concentration totale du tampon et le volume.
  3. Lisez le rapport base/acide ainsi que la quantité de chaque forme à peser.

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Questions fréquentes

Quel tampon dois-je choisir ?

Choisissez un tampon dont le pKa se situe à environ 1 unité du pH cible : c’est dans cette zone qu’il résiste le mieux aux variations. Pour un pH de 7,4, le phosphate ou le HEPES conviennent.

Pourquoi mon tampon indique-t-il un pH différent ?

Les valeurs de pKa varient avec la température et la concentration. Pour le Tris, la variation est d’environ −0,03 par °C ; ajustez donc le pH final avec un pH-mètre et une petite quantité d’acide ou de base.

Que faire si je ne dispose que de la forme acide ?

Pesez la forme acide correspondant à la concentration totale, puis titrez avec de la NaOH (ou avec de la HCl pour une forme basique) jusqu’au pH cible, en utilisant un pH-mètre.

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